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显微操作器(简称微操)是做什么用的?你知道显微操作器有哪些种类吗?该如何选择?显微操作用的针尖儿端如何处理?今天就为您一一讲解。
什么是显微操作?
显微操作(micromanipulation)是指在光学显微镜或解剖镜的可见视野内,操作者一边观察一边使用微玻璃针、解剖刀、吸量管等器具,进行手术、解剖、注射等实验操作。由于早期用于微小生物体的结构解剖,故又称显微手术。
显微操作器的用途有哪些?
目前,以细胞内微注射和微灌注技术为基础的玻璃针头(Glass Needle,精细的玻璃微量毛细移液管)的使用,已经在越来越多的实验生物学研究领域中成为一项非常普遍的操作方法,比如在体外受精、转基因中等等。描述这些技术比较恰当的话应当称其为——显微操作,因为这些操作是通过单个的或多个的筒状玻璃微量移液管、准确的定位装置(显微操作器)以及微量注射器或微量灌注器来在单个的细胞上进行的。
采用显微操作已取得许多实验成果,如分离出微生物或孢子或培养细胞,进行单细胞培养;对生长点等施以显微手术,对其进行功能的研究;插入微电极,进行细胞·细胞间的电位差测量;将细胞核等细胞器进行摘除或移入而进行的生理学或遗传学的实验等。可用于细胞核移植、基因注入、胚胎切割等手术,也可用于分离单个细胞。包括细胞器的移植;各种大分子物质(包括DNA/片段或特定的基因、信使核糖核酸、蛋白质、酶类、荧光抗体、染料等)向细胞、细胞核内的显微注射、异种精子向卵子内的注射、哺乳动物胚泡的显微注射;各种动物的卵子和胚胎、特别是体积极小的哺乳动物卵子和胚胎在体外培养条件下的显微切割、胚胎细胞的交换、重组和聚集以及显微辐射(即用微束紫外光或激光在显微镜下轰击细胞内的某一部分精细结构)等一系列技术。
这些技术的建立对于研究个体发生和细胞分化、核质关系、细胞的结构和生物大分子的功能、细胞的诱变与杂交、基因表达与发育调节、外源遗传物质对细胞、原生质体或生物体的作用等方面均有重要作用。
有些显微操作技术如胚胎切割、嵌合体制作,显微注射外源基因以获得转基因动物等已开始应用到大家畜上;细胞核移植已用于经济鱼类的克隆。
什么是显微操作器(micromanipulator)?
显微操作器(简称微操)或称显微操纵器一种用来在显微镜下对细胞进行细微手术和注射的装置,该装置受机械或电子控制,通过人工操纵能正常运动,或把运动程序输入微处理机,将玻璃毛细管尖儿端、 电极或探针等安装在微操上, 每次以µm或nm进行移动。利用甚小的工具做抓、切、挤压、注入、缩回等动作。
常用的显微操作器有3种:手动显微操作器、 手动/电动一体显微操作器、以及电动显微操作器
显微操作器能够用于体外受精、 膜片钳实验、 细胞外记录、 显微注射, 以及任何要求微小机械位移的场合
显微操作的特点是直观、定位准确并可进行稳定的三维操作。它使各类手术操作的度量水平比在肉眼和徒手条件下的操作提高了成百至上千倍。显微镜的高分辨率加上显微工具及其三维驱动装置以及微量注射液压装置等的高精密度,使显微操作可达到很高的准确度。分为显微镜下操作和解剖镜下操作两类。
显微镜下操作的设备:包括配有倒相和长焦距物镜的显微镜、显微操作器、显微工具制作器、微电极拉制仪(拉针仪)、磨针仪、煅针仪、抛光仪、显微注射仪等。
微电极拉制仪(拉针仪)也有许多种,如垂直重力式电动拉针器、水平式拉针仪和电磁式拉针器等,先将玻璃毛细管加热到其熔化的温度,再将其拉制成所需的合适大小的直径和锥形,微量移液管小头的直径(小至0.2微米)与显微操作器的高精度相关,它可以用于准确的移液。显微工具制作器是用来制备微针、微吸管、微刀、微钩等显微工具的,它由可调电热丝和除去镜台的解剖镜等组合而成,适于针尖的加工。
抛光仪 电极拉制成功后,其表面必须作优化处理,如用热抛光的方法使电极表面光滑,周围均匀,以提高实验过程中的封接成功率.
锻针仪用于显微注射,可以锻制成各种各样的毛细针,适用于不同的应用。锻针仪除了磨光表面外,还可以切断、弯曲和形成倒钩,适合锻制成各种毛细针尖儿端
磨针仪(微电极研磨仪)使用特殊的电机来*小化研磨平面的不规则运动:确认移液管与研磨平面之间的接触使得能够以更高的精度进行研磨。此外,该型号在所有转速下都能提供稳定的性能 - 从低精度到高精度,再到高速磨削。易于操作的粗和细移动同轴操纵器配备用于微量移液管的垂直操作,这也使得能够进行非常准确的研磨。量角器安装在移液器支架固定部分上,使得易于设定所需的研磨角度
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解剖镜下操作的设备:这里所用设备的精密度没有显微镜下使用的高,可根据研究对象及研究目的自行设计。解剖镜用显微操作器适用于两栖类和鱼类等卵子的细胞核移植和核酸或基因的卵内显微注射等工作。
显微操作用仪器应根据具体的实验材料和实验目的及现有设备来选择,并注意仪器间的配套。
有些在解剖镜下的实验操作不需要特殊的显微操作装置,可直接用双手持显微工具进行。如手持玻璃针在解剖镜下分离动物胚胎的卵裂球、分离胚胎组织及进行组织块移植等。