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动物实验结束后,为了减轻动物的疼痛及痛苦,此时从人道主义的观点出发可以对这些动物实施安乐死(Euthanasia)。实施安乐死时有一些特殊的要求需要考虑,重要的是安乐死的方法必须人道。动物实验中,有时为了获得动物组织器官进行研究,需要处死动物,安乐死的方法应该对动物的组织器官的研究没有影响。另外,实施安乐死的方法还要可靠、有效、经济、容易实施,对实验人员必须安全。
本文对实验动物安乐死技术、《指南》对我国实验动物安乐死处理有什么启发和指导作用、实验动物安乐死涉及的福利指标、实验动物安乐死对提升动物福利伦理作用等内容进行了详细讲解。文末附动物安乐死工作工作站购买链接。
从大的背景来说,当时实验动物安乐死的理念在我国已被逐步认可,相关的法规要求和标准已逐步发布;同时因合作的进一步加强,无论是科研项目合作还是发表学术论文,实验动物anlesi都已成为实验动物福利伦理的关键问题。但实际工作中究竟该如何选择和实施anlesi才符合国内和要求?这成为实验动物从业人员和科研人员面临的问题。
目前实验动物anlesi在我国也开始得到重视,近几年发布的多项国标均对实验动物anlesi提出具体要求,包括《实验动物福利伦理审查指南》(GB/T 35892-2018)、《实验动物机构 质量和能力的通用要求》(GB/T 27416-2014)、《实验动物福利伦理审查技术规范》(DB11/T 1734-2020)等。在实验动物机构认可工作中,所有的机构已将实验动物anlesi作为重点工作落实,基本可以按照动物种类、动物年龄及实验要求等,选择适合的方式实施anlesi。国内设备厂商也开始生产实验动物anlesi设备包括二氧化碳anlesi仪等。实验动物anlesi实施推进很快。
与欧美等国家相比,我国在实验动物安乐死的研究和实施发展进程方面,仍存在一定差距。美国、英国、加拿大等国家均有专门针对实验动物anlesi的法规要求、技术指南,对anlesi方法的实施条件、操作细节有更严格的规定和要求,在这方面我国还存在差距。其次,在实验动物anlesi方法的评估、新安乐死方法的研究方面,我国还需进一步加强。该部分涉及动物痛苦水平的评估、可用于anlesi药/物或方法的寻找及安乐死设备的研发等内容。实验动物anlesi实施的监督需进一步加强,包括机构内部兽医的监督、IACUC的监督及实验动物管理或认可机构的检查。
anlesi是非常重要的动物福利指标,具体来说,实验动物anlesi涉及的福利指标包括哪些?我国目前出台了哪些与动物福利伦理相关的指导政策或标准?实验动物anlesi对提升动物福利伦理水平表现在哪些方面?
实验动物安乐死涉及的福利指标包括以下几类:动物行为研究,包括厌恶感实验、喜好实验等;神经系统研究,包括监测动物脑电图(EEG)和脑皮层电图 (ECoG);观察动物身体反射,如强直-阵挛发作等;检测动物生理学指标,包括动物心率、血压和皮质醇水平等。
目前我国出台的动物福利伦理相关的指导政策和标准有:《关于善待实验动物的指导性意见》(国科发财字〔2006〕398号)、、《实验动物福利伦理审查指南》(GB/T 35892-2018)、《实验动物机构 质量和能力的通用要求》(GB/T 27416-2014)、《实验动物福利伦理审查技术规范》(DB11/T 1734-2020)、《动物实验人道终点评审指南》(RB/T 173-2018)、《实验动物anlesi评审指南》(待发布)、《实验动物运输通用规范》(待发布)。
常用的实施安乐死的方法可分为两大类:药/物化学法和机械物理法
1.化学药/物法
是指用一种药/物或其他化合物处死动物。常用的是使用过量的全身麻醉剂,使动物心跳停止、呼吸衰竭而死亡。戊巴/比妥相对来说作用迅速、给药简单、价格低廉,是常用的实施anlesi选择的药/物,腹腔或静脉注射过量的戊巴/比妥(100~150mg/kg)即可。巴比/妥酸盐可致血管扩张,引起器官淤血,可能影响组织学研究。
用于安乐死的吸入麻醉剂有、氟烷、恩氟烷和异氟烷等。CO2也常被用做安乐死的吸入剂。将动物放置含有100%CO2的环境中,很多种动物就产生严重的呼吸困难而死亡。用这种方法处死动物时,动物意识清醒,能感受到痛苦,不是理想的方法。如果将动物放置在一定湿度、C02和O2的比例为6:4的混合气体环境中,等动物逐渐丧失意识后,将CO2浓度升至100%,在至少保持10min以确定动物死亡,这时,动物*是在无意识状态下死亡的,死亡需30~60min,如果时间太长,则不是优先的方法。CO2等吸入剂能诱发动物肺水肿,可能影响其后研究中对动物组织器官的利用。
2.机械物理法
大多数的药/物化学法存在着潜在干扰某些实验结果的可能性,所以利用机械物理法实施anlesi可能更适合动物处死后利用某些特定的组织器官进行生物化学或组织学检查。如果有可能,在应用机械物理法处死动物时,应尽可能使用一些镇/静剂或麻醉剂。所有的机械物理法都可能对动物造成痛苦。所以在挑选一种anlesi的方法时,应当考虑到这一点。机械物理法包括断头术(Decapitation)和颈椎脱臼术(Dislocation of cervical vertebra)。断头术和颈椎脱臼术适合于小鼠、大鼠、仓鼠、沙鼠、小狗、小猫和小鸟,并不适宜于大动物。如果机械物理法能被快速、专业地完成,就不会给动物带来疼痛。实施机械物理法后,应给动物放血或损毁大脑,确保动物死亡。
对于新生的动物和体重小于20g的动物,可以把它们浸入液氮中迅速冷冻来实施anlesi。这种方法能否使动物快速丧失意识还受到一些人的质疑。另一种替代方法是对动物的中/枢神经系统进行微波照射,使动物立刻死亡,动物的组织器官生化特性不发生改变。如果使用微波,必须有相应的设备。
对于大型的实施动物,如体型较大的犬、猪、反刍动物、马等,可以先麻醉,使其丧失意识,然后切断其颈总动脉放血,使之立即死亡。
虽然在今天的科学技术下,我们还不得不依靠动物实验来积累临床经验,但我们明白,人和地球上的所有动物和谐发展才是自然赋予地球生命的意义。让我们对实验动物致以无限敬意,在心中为它们默默慰问。
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